科研服务-ELISA检测

酶标仪

 

检测原理:ELISA检测即酶联免疫吸附实验,也经常被称为酶免疫分析(EIA)。ELISA检测和其他类型的免疫测定法一样,依靠抗体并利用高度特异性的抗体-抗原相互作用来检测靶抗原。


检测样本:动物血清、血浆、尿液、组织、细胞培养液、细胞样本等(避免溶血)。

 

检测依据:全国临床检验操作规程

 

下单前请咨询:电话4000390208转2,QQ:800858251检测业务。

 

委托检测流程:

①客户跟客服了解检测事项,下载并填写《委托检测合同》,电子版发客服确认后,签名盖章。②客户将样品和《委托检测合同》寄到我中心,并通知客服。③客户将检测费用汇入指定账号,并将银行回执发给客服。④款项到账后开始检测,并开具发票。⑤检测结束后,快递检测报告给客户。(建议关注顺丰速运公众号,知悉报告快递情况)

下载委托合同:http://www.gdmlac.com.cn/index.php?q=download

 

中心简介:

广东省卫生健康委直属事业单位,华南地区领先的实验动物生产、实验和检测的一体化平台。已取得CNAS认可、CMA认定、GLP证书、特殊食品验证评价技术机构备案、危险废物鉴别能力评价等资质,具备开展药品、食品、医疗器械等18大类涵盖药理、毒理、理化等326项检测资质。

CMA资质注册号:201919004313

CNAS资质注册号:CNAS L3623

GLP资质注册号:CNAS GLP0016

特殊食品资质备案号:TY01261268

危废资质注册号:粤环鉴证第19015号

ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 ,它是一种特殊的试剂分析方法,是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。

1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。

ELISA测定通常在多孔板中进行(48或96孔)。多孔板提供了固定抗原的固体表面。分析物的固定促进了抗原与样品中的其余组分分离。这种特性使ELISA 成为最简单的同时检测多个样品的方法之一。

ELISA检测优缺点

优点
缺点
高灵敏度和特异性:因为使用了抗体,所以ELISA通常可以非常特定的方式检测皮克级的抗原。 临时读数:检测基于酶/底物反应,因此必须在很短时间内获得读数。
高通量:商业ELISA试剂盒通常采用96孔板形式。但是测定能够轻松适用于 384孔板。 有限的抗原信息:仅限于样品中抗原的数量或存在的信息。
操作简单:实验方案简单易行且操作用时极短。  
定量:能够确定样品中的抗原浓度。  
可以测试各种样品类型:血清、血浆、细胞和组织提取物、尿液和唾液等。  

ELISA类型

ELISA测定具有多种形式,每一种各有优缺点。下图描述了ELISA的四种主要的不同类型。

1. 直接ELISA:将抗原固定于多孔板表面,用特定于该抗原并且直接偶联到HRP或其他检测分子的抗体检测。2. 间接ELISA:间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。
3. 夹心ELISA:这种形式需要特定于该抗原的不同表位的两种抗体。这两种抗体通常被称为匹配抗体对。其中一种抗体包被于多孔板表面上并用作捕获抗体以促进抗原的固定。另一种抗体被偶联并促进抗原的检测。4. 竞争ELISA:也被称为抑制ELISA 或竞争免疫测定法,这种测定法通过检测信号干扰测量抗原浓度。标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,最后的显色也愈浅。不同ELISA检测方法的优缺点

 

优点

缺点

直接ELISA

实验方案简短:节省时间和试剂。

无二抗交叉反应。

潜在背景偏高:样品中所有的蛋白质都结合到表面。

无信号放大。

低灵活性:一抗必须偶联

间接ELISA

信号放大:多个二抗将与一抗结合。

高灵活性:同一个二抗可能被用于多个一抗。

和直接ELISA相比实验方案长。

潜在的二抗交叉反应。

夹心ELISA

高特异性:涉及检测同一抗原上的不同表位的两种抗体。

适用于复杂样品。

高灵活性和灵敏度:可使用直接和间接两种方法。

需要设计:有时候很难找到针对同一靶标、能识别其不同表位并能很好地协同工作的两种抗体。

竞争ELISA

取决于选择的基本ELISA。

适用于小抗原。

取决于选择的基本ELISA。

注:资料图片来源Abcam和网络。